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2341农药残留量测定-气相色谱仪法和质谱法
发布时间:2019-03-06 10:15  | 作者: admin  | 来源: 未知
2341农药残留量测定-气相色谱仪法和质谱法

    本方法系用气相色谱仪法(通则0521)和质谱法(通则 0431)测定药材、饮片及制剂中部分农药残留量。除另有规定外,按下列方法测定。
 
第一法 有机氯类农药残留量测定法-气相色谱仪
    1.9种有机氯类农药残留量测定法
    色谱条件与系统适用性试验:以(14%-氰丙基-苯基)甲基聚硅氧烷或(5%苯基)甲基聚硅氧烷为固定液的弹性石英毛细管柱(30m×0.32mm×0.25μm) ,63Ni-ECD 电子捕获检测器。进样口温度230℃,检测器温度300℃,不分流进样。程序升温:初始100℃,每分钟10℃升至220℃,每分钟8℃升至250℃,保持10分钟。理论板数按α-BHC峰计算应不低于1×106,两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。
 
    对照品贮备溶液的制备:精密称取六六六(BHC)(α-BHC,β-BHC,γ-BHC,δ-BHC)、滴滴涕(DDT) (p,p'-DDE,p,p'-DDD,o,p'-DDT,p,p'-DDT)及五氯硝基苯 (PCNB)农药对照品适量,用石油醚(60~90℃)分别制成每1ml约含4~5μg的溶液,即得。
 
    混合对照品贮备溶液的制备: 精密量取上述各对照品贮备液0.5ml,置10ml量瓶中,用石油醚(60~90℃)稀释至刻度,摇匀,即得。
 
    混合对照品溶液的制备:精密量取上述混合对照品贮备液,用石油醚(60~90℃)制成每1L分别含0μg、1μg、5μg、 10μg、50μg、100μg、250μg的溶液,即得。
 
    供试品溶液的制备:药材或饮片  取供试品,粉碎成粉末(过三号筛),取约2g,精密称定,置100ml具塞锥形瓶中,加水20ml浸泡过夜,精密加丙酮40ml,称定重量,超声处理30分钟,放冷,再称定重量,用丙酮补足减失的重量,再加氯化钠约6g,精密加二氯甲烷30ml,称定重量,超声15分钟,再称定重量,用二氯甲烷补足减失的重量,静置(使分层),将有机相迅速移入装有适量无水硫酸钠的100ml具塞锥形瓶中,放置4小时。精密量取35ml,于40℃水浴上减压浓缩至近干,加少量石油醚(60~90℃)如前反复操作至二氯甲烷及丙酮除净,用石油醚(60~90℃)溶解 并转移至10ml具塞刻度离心管中,加石油醚(60~90℃)精密稀释至5ml,小心加入硫酸1ml,振摇1分钟,离心(3000 转/分钟)10分钟,精密量取上清液2ml,置具刻度的浓缩瓶 (见图)中,连接旋转蒸发器,40℃下(或用氮气)将溶液浓缩至适量,精密稀释至1ml,即得。
    
    制剂  取供试品,研成细粉(蜜丸切碎,液体直接量取),精密称取适量(相当于药材2g),以下按上述供试品溶液制备法制备,即得供试品溶液。
 
    测定法  分别精密吸取供试品溶液和与之相对应浓度的混合对照品溶液各1μl,注入气相色谱仪,按外标法计算供试品中9种有机氯农药残留量。
 
 2.22种有机氯类农药残留量测定法
    气相色谱仪色谱条件及系统适用性试验:分析柱:以50%苯基50%二甲基聚硅氧烷为固定液的弹性石英毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm),验证柱:以100%二甲基聚硅氧烷为固定液的弹性石英毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm),63Ni-ECD电子捕获检测器。进样口温度240℃,检测器温度300℃,不分流进样,流速为恒压模式(初始流速为1.3ml/min)。程序升温:初始70℃,保持1分钟,每分钟10℃升至180℃,保持5分钟,再以每分钟5℃升至220℃,最后以每分钟100℃升至280℃,保持8分钟。理论板数按α-BHC计算应不低于1×106,两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。
 
    对照品贮备溶液的制备:精密称取表1中农药对照品适量,用异辛烷分别制成如表1中浓度,即得。
 
    混合对照品贮备溶液的制备:精密量取上述对照品贮备溶液各1ml,置100ml量瓶中,用异辛烷稀释至刻度,摇匀,即得。
 
    混合对照品溶液的制备:分别精密量取上述混合对照品贮备溶液,用异辛烷制成每1L分别含10μg、20μg、50μg、100μg、200μg、500μg的溶液,即得(其中β-六六六、异狄氏剂、p,p'-滴滴滴、o,p'-滴滴涕每1L分别含20μg、40μg、100μg、200μg、400μg、1000μg)。
 
    供试品溶液的制备:取供试品,粉碎成粉末(过三号筛),取约1.5g,精密称定,置于50ml聚苯乙烯具塞离心管中,加入水10ml,混匀,放置2小时,精密加入乙腈15ml,剧烈振摇提取1分钟,再加入预先称好的无水硫酸镁4g与氯化钠1g的混合粉末,再次剧烈振摇1分钟后,离心(4000转/分钟)1分钟。精密吸取上清液10ml,40℃减压浓缩至近干,用环己烷-乙酸乙酯(1:1)混合溶液分次转移至10ml量瓶中,加环己烷-乙酸乙酯(1:1)混合溶液至刻度,摇匀,转移至预先加入1g无水硫酸钠的离心管中,振摇,放置1小时,离心(必要时滤过),取上清液5ml过凝胶渗透色谱柱(400mm×25mm,内装BIO-Beads S-X3填料;以环己烷-乙酸乙酯(1:1)混合溶液为流动相;流速为每分钟5.0ml)净化,收集18~30分钟的洗脱液,于40℃水浴减压浓缩至近干,加少量正己烷替换两次,加正己烷1ml使溶解,转移至弗罗里硅土固相萃取小柱[1000mg/6ml,用正己烷-丙酮(95:5)混合溶液10ml和正己烷10ml预洗]上,残渣用正己烷洗涤3次,每次1ml,洗液转移至同一弗罗里硅土固相萃取小柱上,再用正己烷-丙酮(95:5)混合溶液10ml洗脱,收集全部洗脱液,置氮吹仪上吹至近干,加异辛烷定容至1ml,涡旋使溶解,即得。
 
    测定法:分别精密吸取供试品溶液和混合对照品溶液各1μl,注入气相色谱仪,按外标标准曲线法计算供试品中22种有机氯农药残留量。
 
    限度:除另有规定外,每1kg中药材或饮片中含总六六六(α-BHC,β-BHC,γ-BHC,δ-BHC之和)不得过0.2mg;总滴滴涕(p,p'-DDE,p,p'-DDD,o,p'-DDT,p,p'-DDT之和)不得过0.2mg;五氯硝基苯(Quintozene)不得过0.1mg;六氯苯(Hexachlorobenzene)不得过 0.1mg;七氯(Heptachlor)、顺式环氧七氯(Heptachlor-exo-epoxide)和反式环氧七氯(Heptachlor-endo-epoxide)之和不得过0.05mg;艾氏剂(Aldrin)和狄氏剂(Dieldrin)之和不得过0.05mg;异狄氏剂(Endrin)不得过0.05mg;顺式氯丹(cis-Chlordane)、反式氯丹(trans-Chlordane)和氧化氯丹(oxy-Chlordane)之和不得过0.05mg; α-硫丹(α-Endosulfan)、β-硫丹(β-Endosulfan)和硫丹硫酸盐(Endosulfan sulfate)之和不得过3mg。
 
    【附注】
    (1)当供试品中有农药检出时,可在验证柱中确认检出的结果,再进行定量。必要时,可用气相色谱仪--质谱法进行确证。
(2)加样回收率应在70%~120%之间。
  第二法  有机磷类农药残留量测定法-气相色谱仪
    色谱条件与系统适用性试验:以50%苯基50%二甲基聚硅氧烷或(5%苯基)甲基聚硅氧烷为固定液的弹性石英毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm),氮磷检测器(NPD)或火焰光度检测器(FPD)。进样口温度220℃,检测器温度300℃,不分流进样。程序升温:初始120℃,每分钟10℃升至200℃,每分钟5℃升至240℃,保持2分钟,每分钟20℃升至270℃,保持0.5分钟。理论板数按敌敢畏峰计算应不低于6000,两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。
 
    对照品贮备溶液的制备:精密称取对硫磷、甲基对硫磷、乐果、氧化乐果、甲胺磷、久效磷、二嗪磷、乙硫磷、马拉硫磷、杀扑磷、敌敌畏、乙酰甲胺磷农药对照品适量,用乙酸乙酯分别制成每1ml约含100μg的溶液,即得。
 
    混合对照品贮备溶液的制备:分别精密量取上述各对照品贮备溶液1ml,置20ml棕色量瓶中,加乙酸乙酯稀释至刻度,摇匀,即得。
 
    混合对照品溶液的制备:精密量取上述混合对照品贮备溶液,用乙酸乙酯制成每1ml含0.1μg、0.5μg、1μg、2μg、 5μg的浓度系列,即得。
 
    供试品溶液的制备:药材或饮片  取供试品,粉碎成粉末(过三号筛),取约5g,精密称定,加无水硫酸钠5g,加入乙酸乙酯50~100ml,冰浴超声处理3分钟,放置,取上层液滤过,药渣加入乙酸乙酯30~50ml,冰浴超声处理2分钟,放置,滤过,合并两次滤液,用少量乙酸乙酯洗涤滤纸及残渣,与上述滤液合并。取滤液于40℃以下减压浓缩至近干,用乙酸乙酯转移至5ml量瓶中,并稀释至刻度;精密吸取上述溶液1ml,置石墨化炭小柱(250mg/3ml用乙酸乙酯5ml预洗)上,用正己烷-乙酸乙酯(1:1)混合溶液5ml洗脱,收集洗脱液,置氮吹仪上浓缩至近干,加乙酸乙酯定容至1ml,涡旋使溶解,即得。
 
    测定法:分别精密吸取供试品溶液和与之相对应浓度的混合对照品溶液各1μl,注入气相色谱仪,按外标法计算供试品中12种有机磷农药残留量。
 
    第三法  拟除虫菊酯类农药残留量测定法-气相色谱仪
    色谱条件与系统适用性试验:以(5%苯基)甲基聚硅氧烷为固定液的弹性石英毛细管柱(30m×0.32mm×0.25μm),63Ni-ECD电子捕获检测器。进样口温度270℃, 检测器温度330℃。不分流进样(或根据仪器设置最佳的分流比)。程序升温:初始160℃,保持1分钟,每分钟10℃升至278℃,保持0.5分钟,每分钟1℃升至290℃,保持5分钟。理论板数按溴氰菊酯峰计算应不低于105,两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。
 
    对照品贮备溶液的制备:精密称取氯氰菊酯、氰戊菊酯及溴氰菊酯农药对照品适量,用石油醚(60~90℃)分别制成每1ml约含20~25μg的溶液,即得。
 
    混合对照品贮备溶液的制备:精密量取上述各对照品贮备液1ml,置10ml量瓶中,用石油醚(60~90℃)稀释至刻度,摇匀,即得。
 
    混合对照品溶液的制备  精密量取上述混合对照品贮备液,用石油醚(60~90℃)制成每1L分别含0μg、2μg、8μg、40μg、200μg的溶液,即得。
 
    供试品溶液的制备:药材或饮片  取供试品,粉碎成粉末(过三号筛),取约1~2g,精密称定,置100ml具塞锥形瓶中,加石油醚(60~90℃)-丙酮(4:1)混合溶液30ml,超声处理15分钟,滤过,药渣再重复上述操作2次后,合并滤液,滤液用适量无水硫酸钠脱水后,于40~45℃减压浓缩至近干,用少量石油醚(60~90℃)反复操作至丙酮除净,残渣用适量石油醚(60~90℃)溶解,置混合小柱[从上至下依次为无水硫酸钠2g、弗罗里硅土4g、微晶纤维素1g、氧化铝1g、无水硫酸钠2g,用石油 醚(60~90℃)-乙醚(4:1)混合溶液20ml预洗]上,用石油醚(60~90℃)-乙醚(4:1)混合溶液90ml洗脱,收集洗脱液,于40~45℃减压浓缩至近干,再用石油醚 (60~90℃)3~4ml重复操作至乙醚除净,用石油醚(60~90℃)溶解并转移至5ml量瓶中,并稀释至刻度,摇匀, 即得。
 
测定法:分别精密吸取供试品溶液和与之相对应浓度的混合对照品溶液各1μl,注入气相色谱仪,按外标法计算供试品中3种拟除虫菊酯农药残留量。
 
第四法 农药多残留量测定法-质谱法
    1.气相色谱仪-串联质谱法
    气相色谱仪色谱条件  以5%苯基甲基聚硅氧烷为固定液的弹性石英毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm色谱柱)。进样口温度240℃ ,不分流进样。载气为高纯氦气(He)。进样口为恒压模式,柱前压力为146kPa。程序升温:初始温度70℃,保持2分钟,先以每分钟25℃升温至150℃,再以每分钟3℃升温至200℃,最后以每分钟8℃升温至280℃,保持10分钟。
 
    质谱条件:以三重四极杆串联质谱仪检测;离子源为电子轰击源(EI),离子源温度230℃。碰撞气为氮气或氩气。质谱传输接口温度280℃。质谱监测模式为多反应监测(MRM),各化合物参考保留时间、监测离子对、碰撞电压 (CE)与检出限参考值见表2。为提高检测灵敏度,可根据保留时间分段监测各农药。