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高效液相色谱仪测定妇炎康中7种有效成分
发布时间:2018-11-24 08:48  | 作者: admin  | 来源: 未知
高效液相色谱仪测定妇炎康中7种有效成分



 妇炎康主要含鸡血藤、丹参、穿心莲和功劳叶等,本法主要测定:1、鸡血藤中两种主要有效成分:原儿茶酸、原儿茶醛同时测定。2、丹参中主要有效成分:隐丹参酮、丹参酮Ι、丹参酮ΠΑ的测定。3、穿心莲中主要有效成分:穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的测定。
一、 主要仪器及试剂
高效液相色谱仪梯度系统,配紫外
超声波清洗机
离心机
分析天平
甲醇:色谱纯
无水乙醇:分析纯
醋酸:分析纯
对照品:原儿茶酸、原儿茶醛、隐丹参酮、丹参酮Ι、丹参酮ΠΑ、穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯,单标。
实验室用水为二次蒸馏水。
二、 实验部分
1、 鸡血藤中两种主要有效成分:原儿茶酸、原儿茶醛同时测定
a、 色谱条件
色谱柱:C18色谱柱,250 mm ×4.6 mm, 5μm
流动相:甲醇:1%醋酸=25:75(V:V)
流速  :1.0ml/min
检测波长:280nm
柱温:28℃
进样量:20ul
b、 混合对照品的制备
精密称取原儿茶酸对照品17.6mg,原儿茶醛对照品13.7mg,用色谱甲醇溶解,定容于25ml容量瓶中,备用。
c、 样品溶液的制备
将样品置于研钵中研制成粉末状,精密称取1g左右样品于25ml容量瓶,加甲醇至刻度线,超声处理40min,放至室温,取适量上清液,用0.45um膜过滤,备用。
 
妇炎康主要含鸡血藤、丹参、穿心莲和功劳叶等,高效液相色谱仪测定妇炎康中7种有效成分原儿茶酸、原儿茶醛、隐丹参酮、丹参酮Ι、丹参酮ΠΑ、穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯。
 
2、 穿心莲、丹参中有效成分的测定
a、 色谱条件
色谱柱:C18色谱柱,250 mm ×4.6 mm, 5μm
流动相:水(A)—甲醇(B),梯度洗脱(0~15min,58%B;15~35min,80%B;35~40min,58%B)
          流速 :1.2ml/min
          柱温 :28℃
          检测波长:254nm
          进样量:20ul
b、 对照品溶液的制备
分别精密称取经五氧化二磷干燥12h以上的脱水穿心莲酯、丹参酮ΠΑ、穿心莲内酯、隐丹参酮、丹参酮Ι分别为:12.3、9.2、19.6、18.1、10.4mg于同一25ml容量瓶中,用色谱甲醇溶解,定容至25ml,摇匀,即得对照品溶液。
c、 样品溶液的制备
精密称取2g左右样品于25ml量瓶中,加甲醇定容至刻度,超声30min,离心10min(转速为5000r/min),取适量上清液,经0.45ul膜过滤,备用。