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高效液相色谱仪测定固体废物中多环芳烃类的含
发布时间:2019-11-11 09:30  | 作者: admin  | 来源: 未知
高效液相色谱仪测定固体废物中多环芳烃类的含量



一、范围
本方法适用于固体废物中苊、苊烯、蒽、苯并(a)蒽、苯并(a)芘、苯并 (b)荧蒽、苯并(ghi)苝、苯并(k)荧蒽、二苯并(ah)蒽、荧蒽、芴、茚并(1,2,3-cd)芘、萘、菲、芘等多环芳烃(PAH)的高效液相色谱仪测定。
 
二、原理
本方法提供了用高效液相色谱仪检测 ppb 含量的多环芳烃的 HPLC 条件。.在使用这种方法之前,必需采用适当的样品提取技术。提取物 5-25µ1 注入 HPLC,经色谱分离后流出物用紫外(UV)和荧光检测器检测。
 
三、试剂和材料
3.1 试剂水,无有机物的试剂级水。
 
3.2 乙腈,HPLC 纯,经玻璃装置蒸馏过。
 
3.3 贮备标准溶液
 
3.3.1 制备浓度为 1.00µg/µl 的储备标准溶液,制备方法是将 0.0100g 的标准参考物质溶解在乙腈中,然后转移到 10ml 容量瓶内,用乙腈稀释至刻度。制备较大量的体积对分析者来说更方便些。当标准参考物的纯度经分析为 96%或大于 96%时,称得重量不需校准而直接计算储备标准溶液的浓度。如果市售的储备标准溶液的纯度已由制造商或独立来源所确认,可直接配成各种浓度来使用。
 
3.3.2 转移储备标准溶液到有聚四氟乙烯衬里密封的旋盖瓶内,在 4℃避光保存。储备标准溶液要经常检查是否有降解和蒸发的迹象。
 
3.3.3 储备标准溶液在贮放 1 年以后,或者在检查中一旦发现有问题时都应立即重新配制。
 
3.4 校准标准溶液,可利用添加乙腈稀释储备标准溶液的方法制备,至少要配制 5 种不同浓度的校准溶液。其中一种浓度含量是接近但高出于方法检测限,其他 4 种浓度含量相当于实际样品中预期的浓度范围,或者能符合高效液相色谱仪的分析范围要求。校准标准溶液在贮放半年以后,或者在检查中一旦发现有问题时都应即时重新配制。
 
3.5 内标标准溶液(如果使用内标校准法的话)。使用这种方法时,必须选择和待测物具有相似特性的一种或多种内标标准物,同时分析者还需证实,内标标准物在测量中不受该方法和基体干扰的影响,由于上述这些条件的限制,没有一种内标能应用于所有样品。
 
3.5.1 对每个待测物,都至少要配制 5 种不同浓度的校准溶液。
 
3.5.2 对每一种校准溶液,应加入已知含量一种或多种内标溶液,然后用乙腈稀释到定容体积。
 
3.6 代用品标准物,在处理各种样品基体时加入 1 种或 2 种适合于本方法的温度程序范围的代用品标准物到各种样品、标准物和试剂水中(代用品标准物如:十氟代联苯,或样品中不存在的其他多环芳烃),以监测提取、净化(如需要的话)和分析系统的性能以及本方法的有效性。由于共同的洗涤问题的影响,高效液相色谱仪分析中不用待测物的,氘的同系物将作为代用品标准物。
 
四、仪器、设备
4.1 K-D 浓缩器.
 
4.1.1 浓缩管,10ml 带刻度用磨口玻璃塞以避免提取物的挥发。
 
4.1.2 蒸发烧瓶,500ml 用弹簧与浓缩器相连。
 
4.1.3 Snyder 柱,三球微型。
 
4.1.4 Snyder 柱,两球微型。
 
4.2 沸片,用溶剂提取过,约 10-40 目(硅碳化物或其相当物)。
 
4.3 水浴,能控温在±5℃,该水浴应在通风橱内使用。
 
4.4 注射器,5ml。
 
4.5 高压注射器。
 
4.6 高效液相色谱仪仪器。
 
4.6.1 梯度泵系统,恒流量。
 
4.6.2 反相色谱柱,ODS 色谱柱,填料粒径为 5µm,250mm× Φ 4.6mm。
 
4.6.3 检测器,紫外或荧光检测器。
 
4.7 容量瓶,10、l5 和 100ml。
 
五、分析步骤
5.1 提取
 
5.1.1 一般来说,水样的提取是按照 GB5085.3 附录 U,先把水样 pH 值调为中性后用二氯甲烷提取。固体样品的提取则按照 GB5085.3 附录 V。为使该方法达到最高灵敏度,提取物的体积应浓缩到 lml。
 
5.1.2 在高效液相色谱仪分析之前,提取物的溶剂必须更换为乙腈。可以用 K-D 浓缩器来进行这种更换,具体操作如下:
 
5.1.2.1 将 Snyder 微柱连接到 K-D 浓缩器后,把二氯甲烷的提取物浓缩到 1ml,然后冷却和沥干至少10min。
 
5.1.2.2 先将水浴温度上升到 95-100℃,然后把 K-D 浓缩器上 Snyder 微柱迅速移出,加入 4ml 乙腈和新的沸片,安装上二球 Snyder 微柱并用 1ml 乙腈将柱润湿,最后把这套 K-D 浓缩器放置到水浴上,让浓缩管的一部分被热水浸没。根据需要调整装置的垂直位置和水的温度,以使在 15-20min 内完成浓缩。
 
在适合蒸发比时,Snyder 柱内微球将会有吱吱声,但球室内不会有液体溢流。当浓缩的液体表观体积达到 0.5ml 时,从水浴上移出 K-D 装置,让它冷却沥干至少 10min。
 
5.1.2.3 当 K-D 装置冷却以后,移去 Snyder 微柱,并用约 0.2ml 乙腈洗涤下部连接端,洗涤液流入浓缩管内,推荐用 5ml 注射器来完成这一步骤,并调整提取物总体积到 1.0ml。如不立即进行以下步骤,把浓缩管取下盖上塞后贮放在 4℃冰箱内.如果提取物贮放时间超过两天,则应转移到有聚四氟乙烯衬垫密封的旋盖瓶内贮放,如不需要进一步纯化即可作高效液相色谱仪分析用。
 
5.2 高效液相色谱仪分析条件
 
先用乙腈-水=4:6(V/V)以 0.5ml/min 流速洗脱 5min,然后作线性梯度洗脱,在 25min 内乙腈浓度由 40%上升到 100%。如果使用其他内径的柱,则应调整流速使其线速度保持在 2mm/s。